基因檢測用口腔脫落細胞采樣管

簡要描述:
基因檢測用口腔脫落細胞采樣管(別名基因采樣管,口腔采樣拭子)用于采集任何年齡段人群的DNA樣本,簡單、無痛、無創;樣本采集后運輸方便,不需冷鏈運輸。

產品描述

 基因檢測用口腔脫落細胞采樣管  

 【基因檢測用口腔脫落細胞采樣管   用途與描述】

基因檢測用口腔脫落細胞采樣管(即口腔采樣拭子)用于口腔上皮脫落細胞的采集、保存,后續通過提取核酸的方法獲得樣本的DNA。

口腔黏膜為復層鱗狀上皮,具有代謝旺盛、更新快、易脫落的特點,其上皮脫落細胞雖然細胞核固縮,但與其他組織細胞一樣,具有完整的基因組DNA,可以代替血液樣本,成為法醫學和遺傳學DNA多態性檢測分型的理想生物性檢驗材料。

采樣管保存液中含有能使DNA酶、RNA酶失活的成分,并能抑制細菌的繁殖,延緩細胞裂解和核酸降解,在常溫運輸條件下,采集的樣本7天后仍能滿足后續的檢測需求。

【基因檢測用口腔脫落細胞采樣管   規格與保存】

產品貨號產品名稱產品規格保存條件有限期限
MT0801基因檢測用口腔脫落細胞采樣管100*16mm采樣管(含2ml采樣液),
采樣拭子2支。50支/盒
2-8℃保存12個月

【基因檢測用口腔脫落細胞采樣管   主要成份】

【基因檢測用口腔脫落細胞采樣管   使用方法】

1.采樣前
1)準備一杯清水,飲入約50ml清水充分洗漱口腔約10秒,吐掉,重復此步驟2次。
2)漱完口后,30分鐘內不喝水,不吃東西,不吸煙等。

2.口腔脫落細胞采集
1)拆開采樣管的外包裝,在箭頭標示處撕開拭子包裝,取出拭子(手握拭子桿的距離不超過拭子桿的一半)。
2)將拭子頭伸進左側口腔,用刷牙的力度使拭子頭與左側臉頰內壁上下摩擦,同時旋轉拭子,讓拭子頭盡量多的刮取口腔細胞,重復此動作半分鐘。
3)將拭子頭端伸入到采樣管內2-33m,折斷拭子桿。
4)將另一支拭子頭伸進右側口腔,重復步驟2)的方法刮取右側臉頰內壁的口腔細胞。
5)將拭子頭端伸入到采樣管內2-33m,折斷拭子桿。
6)旋緊管蓋。

3.樣本運送
1)在采樣管標簽上按要求填寫相關信息。
2)將裝有采樣管的自封袋以及送檢登記表常溫運輸到基因檢測公司。

 【基因檢測用口腔脫落細胞采樣管   性能實驗】
樣本常溫保存7日甚至更長時間,DNA均可檢出

第0天

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反應孔樣本信息:

C3:陽性對照(Ct值13.87 );    E3:采集的樣本(第0天,Ct值16.45);
G3:陰性對照( Ct值27.89);    E4:采集的樣本(第0天,Ct值15.32) 

0天曲線.jpg

由標準曲線y = -4.019x + 19.454可知,采集的樣本的GAPDH濃度為10.7 ug/ul。
基因測序儀的對核酸總量的最低檢出線為 10ng/ul。
第0天采集到的核酸量為最低檢出線的 1000 倍(1ug=1000ng)。 

第2、4天

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反應孔樣本信息:

B2:陽性對照(Ct值13.18);    C2:陽性對照( Ct值19.17 );
E2:陽性對照(Ct值25.38);    F2:陽性對照(Ct值29.76)
G2:陰性對照(Ct值29.88);    E3:(第4天,Ct值19.40);
E4:(第2天,Ct值17.60)

第2天曲線.jpg

由標準曲線y=-3.937x+20.691可知,樣本第2天的GAPDH濃度為6.1 ug/ul,第4天的GAPDH濃度為2.13 ug/ul。
第2天(48小時)的核酸存量,為最低檢出線的 610 倍。
第4天(96小時)的核酸存量,為最低檢出線的 213 倍。 

第7、12天

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反應孔樣本信息:

B2:陽性對照(Ct值12.76);    C2:陽性對照(Ct值18.45)
E2:陽性對照(Ct值23.81)    F2:陽性對照(Ct值29.70)
G2:陰性對照( No Ct );         D4:(第7天,Ct值21.80)
E4:(第7天,Ct值21.41);      D5:(第12天,Ct值28.63);
E5:(第12天,Ct值28.50) 

第7天曲線.jpg 

由標準曲線y=-3.924x+20.003可知,樣本第7天的GAPDH濃度為393 ng/ul,第12天的GAPDH濃度為6.5 ng/ul。
第7天(24*7小時)的核酸存量,為最低檢出線的 39 倍。完全可以檢出。
第12天(24*12小時)的核酸存量,為最低檢出線的 0.6 倍。已經無法檢出。 
獨立第三方醫學檢測實驗室應用YOCON采樣管做出的保存7天后基因樣本的凝膠電泳圖片: 

凝膠電泳圖1.jpg

樣本保存7天后提取核酸,委托有第三方獨立醫學實驗室資質的基因測序公司按測序要求PCR后,膠回收純化,
GAPDH濃度為185ng/ul,為最低核酸最低檢出線的 18 倍。(膠回收環節大約會損失50%-60%左右的核酸物質)
結論:使用友康基因檢測用口腔脫落細胞采樣管采集保存的樣本完全滿足測序要求(10ng/ul)。

客戶問答

1、你們的基因檢測用口腔脫落細胞采樣管采樣后能保存多長時間?

答:市場上現存的多種口腔脫落細胞采樣管,多源于科研客戶傳統使用的基因測序用途的運輸管。通常應用于運輸時間不超過48h的冷鏈運輸(2-8℃)。若應用到跨省普通常溫快遞,經常發生測序失敗的情況。
友康基因采樣管,應用本公司專利配方,保存液內含能使DNA酶、RNA酶失活的成分,并能抑制細菌的繁殖,延緩細胞裂解和核酸降解。

2、你們這種是用拭子采集樣本,我們是采集唾液樣本的,有什么差異嗎?

答:我們做了口腔纏繞拭子樣本與唾液樣本的差異的實驗,結果如下:

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反應孔樣本信息:

B3:陽性對照(Ct值7.93);    C3:陽性對照(Ct值11.27 )
D3:陽性對照(Ct值14.61);    C4:陽性對照(Ct值18.04
D4:唾液樣本(Ct值17.82);    C4:纏繞拭子樣本(Ct值19.75)

唾液與纏繞曲線 .jpg

由標準曲線y = -3.367x + 21.38可知,唾液樣本GAPDH濃度為11.4 ug/ul,纏繞拭子樣本GAPDH濃度為3.05 ug/ul。
結論:唾液樣本的核酸量是纏繞拭子樣本的3.7倍,但考慮到唾液樣本中酶類和細菌的多樣性及樣本不宜保存,
           應使用纏繞拭子采樣。

采樣拭子與唾液采樣中DNA與時間對應表

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3、你們友康基因采樣保存液與PBS保存液保存有什么差異(均使用纏繞拭子采樣)?

答:均使用纏繞拭子采樣,我們用友康基因采樣保存液與PBS保存液保存分別保存,實驗結果如下:

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反應孔樣本信息:

C3:陽性對照(Ct值13.73);G3:陰性對照(Ct值31.55)    
E3:PBS保存樣本(第0天,Ct值15.35);
F3:PBS保存樣本(第3天,Ct值29.62);

0天曲線.jpg

由標準曲線y = -4.019x + 19.454可知,纏繞拭子樣本第0天GAPDH濃度為10.5 ug/ul,室溫放置后,第3天GAPDH濃度為3 ng/ul。
結論:友康基因采樣保存液與PBS保存液保存的樣本GAPDH濃度相差3500倍。 

4、不是說植絨拭子采樣比較好嗎?你們為什么用纏繞拭子采樣? 

答:我們用口腔纏繞拭子樣本與植絨拭子樣本分別采樣,放到友康基因采樣液中保存。關于兩者之間保存樣本的差異,實驗結果如下:

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反應孔樣本信息:

B2:陽性對照(Ct值12.78);     C2:陽性對照(Ct值16.49)
E2:陽性對照(Ct值24.50);     F2:陽性對照(Ct值28.87);
B4:植絨拭子樣本(第0天,Ct值23.31)
C4:纏繞拭子樣本(第0天,Ct值21.54);   
E4:陰性對照( Ct值31.86 )

 0天曲線.jpg

由標準曲線y = -4.019x + 19.454可知,纏繞拭子樣本GAPDH濃度為0.3 ug/ul,植絨拭子樣本GAPDH濃度為0.11 ug/ul
結論:纏繞拭子樣本的核酸量是植絨拭子的3倍。

使用說明

使用說明下載

背景知識

友康生物基因檢測用口腔脫落細胞采樣管于2016年8月8日上市。該產品以37℃保存7日依然可以檢出DNA而著稱。滿足了基因檢測公司樣本常溫運輸的迫切要求。

基因檢測用口腔脫落細胞采樣管,是應用無菌采樣拭子來采集口腔內部面頰處口腔粘膜的脫落上皮細胞,運輸至專業實驗室進行PCR核酸擴增與基因測序。基因測序唯一需要的目標物僅為上皮細胞中的遺傳物質DNA(核酸)。但在采集的樣本中,除脫落上皮細胞外,還有口腔中固有的細菌及DNA酶、RNA酶。細菌及DNA、RNA酶的存在加速了上皮細胞的破裂及DNA的分解。其途徑是:細菌在25℃及以上的溫度環境中,繁殖迅速,將導致保存液pH值的下降。而pH值更低(偏酸)的保存液環境將加速上皮細胞的破裂。細胞破裂后,遺傳物質DNA釋放出來,在口腔中的DNA酶的分解下,DNA(核酸)迅速降解。當DNA量低至基因測序儀的最低檢出線 (10ng/ul) 后,DNA則不能被檢出。所以對溫度、細菌、DNA酶、RNA酶的有效處理,是決定DNA樣本能否有效保存的關鍵因素。                              

本質上說,如果樣本可以在-20℃,至少4℃運輸,則樣本的短時間保存(7d)不會影響DNA的檢出。但該采樣管是由普通消費者使用的現實情況決定了樣本沒有可能冷藏運輸,只能常溫運輸。這跟傳統科研應用的基因測序樣本(外周血樣)由專業技術人員采集,在4℃冷藏條件下運輸截然不同。而目前市售的絕大多數基因采樣管,均源于科研客戶傳統使用的基因測序用途的運輸管。難以適應常溫運輸要求。因此,經常發生測序失敗的情況。且由于一直以來存在的“重檢測、輕采樣”的思維方式,極少有公司可以為用戶提供對產品使用至關重要的諸如樣本采集的DNA總量、DNA降解的速度、不同溫度狀況對DNA降解的影響、不同配方的采樣液對DNA保存的影響等數據。這樣的市場現狀給基因測序公司帶來了極大的困擾。用一句話來形容目前的市場現狀,就是“稀里糊涂的賣、提心吊膽的用”。

友康生物作為國內在樣本采集領域耕耘10年的企業,已占到了全國病毒采樣領域90%以上的市場份額,擁有樣本采集與運輸豐富的經驗,深刻的理解用戶的需求。友康生物針對目前基因采樣領域的現狀,推出的基因檢測用脫落上皮細胞采樣管,有效抑制了細菌的繁殖,可使DNA酶、RNA酶失活,因此極大延緩細胞的裂解和與核酸降解。該產品最大的賣點就是,能夠做到產品在夏日最炎熱時刻,經物流公司7天集裝箱常溫運輸,DNA依然可以檢出。給用戶帶來了極大的便利。

在極限溫度對DNA降解影響方面:友康生物設計了“37℃培養箱持續7日培養”的實驗方案。讓產品能夠滿足更苛刻的使用環境。實驗結果表明,樣本保存7天后,采樣管內剩余核酸量(DNA)為385ng/ul。是最低檢出線(10ng/ul)的30倍。完全滿足了樣本DNA(核酸)測序的要求。

在不同溫度對DNA降解影響方面:友康生物設計了“37℃培養箱持續7日培養Vs 30℃培養箱持續7日培養樣本“的對比實驗,實驗結果表明,30溫度環境下,采樣管可保存樣本超過30日。保存溫度對DNA檢出影響是巨大的。

在不同采樣液配方對DNA降解影響方面:友康生物設計了“友康采樣液Vs磷酸鹽緩沖鹽(PBS)”的對比實驗。結果表明,應用磷酸鹽緩沖液,僅僅2天,樣本中的核酸(DNA)已經無法檢出。不同配方保存液對DNA檢出影響是巨大的。

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